SYBR GreenⅠ（熒光PCR用）

品名：SYBR GreenⅠ

品牌：金博益

濃度：20×500ul  in DMSO

貨號：GBY-5

保存：-20℃

1.SYBR Green I熒光定量PCR簡介和原理

SYBR Green I與dsDNA 結合熒光信號可增強800—1000倍。在PCR反應體系中，加入過量SYBR Green I熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，熒光信號增強，而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。

2.使用方法：

我們提供的為20×的濃縮液，使用時可稀釋20—100倍，使反應的終濃度為1×到0.2×之間。例如配50ul總體積的PCR反應液，應加20×的SYBR Green I染料0.5ul—2.5ul。

3.使用濃度對熒光PCR結果的影響

SYBR Green I熒光定量PCR的試驗成功有很多因素，但是SYBR Green I的使用濃度是非常關鍵的因素 ，如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低。這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出；而在高濃度時，將會抑制PCR反應。降低PCR反應效率。所以一般在使用SYBR Green I時應根據(jù)實際情況優(yōu)化使用濃度。

4.鎂離子濃度的影響

     提高鎂離子濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應時，鎂離子濃度要比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應要高出 0.5 至3mM。