Geneshow染料使用說明書

   Geneshow  是本公司開發(fā)的新型核酸染料，具有安全、靈敏等突出特點(diǎn)，可以作為各種核酸電泳的染色劑。與高致癌性的EB不同，Geneshow  屬于花青類染料，毒性很低，使用安全。另外，Geneshow 檢測核酸的靈敏度比EB染色法平均高10倍左右。見右側(cè)表格。    與核酸結(jié)合的Geneshow  染料的最大吸收峰為495nm，另外，在紫外區(qū)300nm——380nm還有一個(gè)吸收峰。染料發(fā)射綠光熒光，最大發(fā)射波長為515nm。可以用Generadar(金銳達(dá)）系列可見光凝膠透射儀觀測。也可用紫外凝膠透射儀觀測，效果稍差，但靈敏度等仍好于EB。

一．使用方法：

方法一：用含染料的凝膠進(jìn)行電泳染色法

制膠: 按常規(guī)操作，制備瓊脂糖凝膠，凝膠熔化后，加入10000×Geneshow 染料，使染料在凝膠中的終濃度為1×，（即如果制備50ml凝膠，加入染料5ul）。輕輕搖勻，倒膠。

電泳、觀測：按常規(guī)方法電泳，觀測。

提示：采用本方法電泳，如果樣品的核酸量較大，會(huì)導(dǎo)致樣品帶型不整、并且影響樣品的相對(duì)遷移率。本方法僅適用于含核酸量較小的樣品，如PCR產(chǎn)物、低濃度Marker（商品Marker稀釋5—10）、低濃度的質(zhì)粒、低濃度基因組核酸、及其他任何核酸量較小的樣品。如果樣品的核酸量較大，請使用“方法二”和“方法三”。

方法二：電泳后染方法：

按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。

用PH 7.0 — 8.5 的緩沖液（如：TAE，TBE 或 TE），按照10000：1的比例稀釋Geneshow  染料濃縮液，混勻，制成染色溶液，。

將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10—45分鐘，染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。凝膠越厚、濃度越高，所需染色時(shí)間越長。對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠，可以直接在玻璃平皿上染色（玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過硅烷化溶液處理，避免染料吸附在玻璃表面上）。將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上，讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板，并染色10—30分鐘。

二．其它說明：

該染料為花青類染料，沒有致癌性，但有可能會(huì)刺激皮膚和眼睛。操作時(shí)應(yīng)戴手套。

染料從冰箱中取出后應(yīng)恢復(fù)至室溫，使溶液充分融化，并混勻。

在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過程中，Geneshow  可以全部從雙鏈核酸上去掉。

使用校正液可以消除染料對(duì)電泳遷移率的影響，基本可以準(zhǔn)確判斷未知樣品的分子量。

加入染料的凝膠可反復(fù)熔化使用，但會(huì)使檢測靈敏度下降。

Geneshow 對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過程中用聚丙烯類容器。

儲(chǔ)存：室溫   有效期至少二年。

本品僅供科研使用。